Conformité de l'echantillon: Réactions d'indentifications et Chromatographie

Nous allons maintenant réaliser les réactions d’identifications caractéristiques de notre produit, pour cela, nous réalisons une première solution (A) :

On pulvérise 3g de drogues végétales, on y ajoute 0,5 ml  d’ammoniaque concentrée R. On homogénéise et on verse dans une fiole conique de 100 ml, on y ajoute 20 ml de chloroforme R. On met sous agitation magnétique pendant 15 min. On filtre, puis on fait évaporer le chloroforme sur plaque chauffante jusqu’à siccité. On ajoute 5 ml d’eau bouillant, on filtre après agitation, nous obtenons la solution A.

Solution A

    1) On fait évaporer jusqu’à siccité 2 ml de solution A. On ajoute 0,25 ml de solution concentrée de peroxyde d’hydrogène, 0,25 ml  d’acide chlorhydrique dilué R. Le résidu rouge orangé se colore en rouge foncé au contact d’une goutte ammoniaque dilué R2.

 

                                        Résidu rouge orangé                                                  Devenant rouge foncé

Le test est positif.

    2) On ajoute a 1 ml de solution A, 0,15 ml de solution d’iodure de potassium iodé R, le liquide reste limpide. On ajoute 0,15 ml d’acide chlorhydrique dilué R, il se forme un précipité brun qui se dissout après neutralisation par la solution dilué hydroxyde de sodium R. 

                                                               Absence de précipité     Présence du précipité

Le test est positif.

Nous réalisons ensuite une Chromatographie couche mince sur gel de silice G R (CCM):

Pour cela, on dispose une goutte de solution de caféine à 0,5 % dans alcool à 60% et une goutte de notre préparation d’extrait (cf article précédent). On fait migrer grâce a un solvant de migration 5 volumes de méthanol + 95 volumes de chloroforme.

Après examen sous lampe UV à 254 nm, on observe:

 Résultat de la CCM

Comme  nous pouvons le constater, notre dépôt (gauche) présente une tâche ayant le même rapport frontal que la tâche issue de la solution de caféine. Nous pouvons donc conclure que notre essai possède de la caféine

Pour conclure, nous pouvons affirmer que notre drogue végétale est conforme, pour l'instant, aux exigences de la pharmacopée Française. Nous devons maintenant réaliser des tests plus précis. Mais en même temps, nous commençons à réfléchir sur un projet de médicament. Nous vous présenterons dans les prochains jours l'article de référence que nous utiliserons, ainsi que les premières idées afin de le réaliser.